Integration |
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波谱积分可以提供有关分子的宝贵定量信息，因为波谱积分显示了对特定谱线（或谱线组）有贡献的原子核数量。
Mnova为一维和二维数据集提供了一系列积分算法。可通过菜单项 "分析/积分 "访问这些算法：
自动检测积分
一维波谱
程序自动确定包含信号的区域。该算法使用以下选项：
-计算方法： 您可以选择 "Sum"（经典积分，比 "Peaks "快，但不进行解卷积）、"Edited Sum "或 "Peaks"（只考虑 GSD 波谱的积分，由于应用了解卷积，比 "Sum "算法慢）。在 "峰值 "计算方法中，您可以选择积分将考虑哪些峰值（例如，只考虑化合物峰值， 不考虑溶剂或杂质峰值等......）。
编辑求和：在这种积分方法中，求和方法的值将使用校正因子进行校正：
Sum(Ps_i)/Sum(P_i)： 其中 "Ps_i "为所选峰（默认情况下包括化合物峰，不包括隐藏峰、C13_Sat 峰和旋转峰）；"P_i "为积分范围内的所有峰。 Int（编辑求和）= Int（求和）*（Sum(Ps_i)/Sum(P_i))
有关编辑求和算法的更多信息，请查阅本文：http://pubs.acs.org/doi/abs/10.1021/acs.analchem.5b04911。
-算法： 您可以选择称为 "派生 "的常规算法和基于 "选峰 "的新算法。
-Derivative: 您可以找到下面描述的选项： 灵敏度：该值控制可以检测到多小的峰值。它是一种平滑参数，较大的数值会过滤掉噪声信号。强度较小的峰值也会在自动积分中被忽略。如果无法检测到一些感兴趣的小信号，请降低该值。 合并距离：该参数用于控制积分的分离。分隔距离小于此值的积分区域将被合并为一个积分区域。
最小区域：小于最大积分百分比的积分将被丢弃
- 选峰算法： 该积分算法基于选峰分析。用户可以设置耦合常数的最大值（J Max）、峰宽因子以及积分的最小面积（积分值小于最大积分的给定百分比的积分将被舍弃）。
请注意，该算法基于峰值拾取结果。如果没有进行峰采样，程序会自动进行峰采样，但最好的方法是先进行峰采样，以确保检测到所有真正的峰，更重要的是，确保没有检测到伪峰和非常小的峰（如杂质）。 因此，像往常一样，最好先进行基线校正，然后再进行选峰 - 在这种情况下，确保噪声系数正确是很重要的。 一旦对峰值提取结果感到满意，就可以应用积分算法了。关键参数是 "峰宽因子"；该参数越大，积分段就越宽。
二维波谱 二维波谱的自动积分基于二维峰值拾取 算法。如果在发出自动积分命令时没有应用峰值提取， Mnova 将自动在背景上应用二维峰值提取，然后为检测到的每个峰值找到适用的体积。 因此，控制二维取峰 程序的选项 也适用于二维自动积分算法。
一系列自动取峰选项可在 "取峰选项 "对话框中进行控制，该对话框可通过取峰滚动菜单访问 （请参阅本指南的 "取峰 "部分）。用户可以选择噪声系数（噪声系数越大，选取的峰值越少）、峰值类型、是否使用抛物线插值、二维多重序列的合并选项、最大峰值数等。只要选中"交互式 "复选框，就可以对所有这些选项进行交互式评估，从而在屏幕上 实时查看评估结果。
Mnova 中的峰体积积分是以积分区域（足迹）内所有数字强度的总和来衡量的。足迹有两种形状：矩形或椭圆形足迹。在没有显著精细结构的低分辨率波谱中，椭圆形脚印非常适合，而高分辨率波谱则倾向于根据相关单个多重点的投影显示矩形图案。 默认设置为椭圆形。但您可以在积分选项中将其更改为矩形。
顺便提一下，您也可以通过点击并拖动足迹的边缘来手动更改足迹的大小。 请参阅 积分属性
预定义区域整合
用户可以预定义积分范围，自动进行积分分析。只需执行以下步骤即可：
1.打开 "积分选项 "对话框（点击 "积分 "下拉菜单中的 "选项"）并选择方法："预定 义区域"，如下图所示：
2.这将显示一个新的对话框，用户可以在其中选择需要应用积分的范围。如果您已经对波谱进行了积分，可以点击 "Use Current（使用当前）"按钮导入积分范围：
单击 "OK（确定）"后，积分将应用于当前波谱，并保留可应用于其他波谱的积分区域，只需单击积分菜单中的 "预定义区域 "即可：
用户可以通过点击 "保存积分区域 "图标来保存这些区域供以后使用，点击 "加载积分区 域 "图标即可加载这些区域。要保存积分区域，请点击菜单 "文件/另存为 "并选择 "MestReNova 积分区域"。
您也可以使用 "使用导入 "按钮来使用原始的布鲁克积分。请注意，如果您使用 MNova 导入布鲁克文件，积分将自动出现，但如果您打开的是带有布鲁克数据的旧 Mnova 文件，则此按钮是使用布鲁克范围的方法。使用导入 "按钮可以重新加载原始的布鲁克积分。
要将波谱区域从一个波谱复制粘贴到另一个波谱，只需在原始波谱中按下 "Ctrl/Cmd+C "键，然后在另一个波谱（或多个波谱，如果您之前在页面导航器中选择了这些波谱）中按照菜单 "Home/Paste/NMR Integrals"（主页/粘贴/核磁共振积分）操作即可：
积分列表也可以导出为 ASCII 文件，方法是在菜单 "文件/另存为 "中选择 "脚本"：积分 1D (*.txt)"（或 2D，取决于数据集）。您还可以导出积分序列和表格：
手动积分 （快捷键：I）
首先，点击手动积分命令选择积分模式，如下图所示：
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-接下来，单击并拖动鼠标，选择要积分的区域 -第一个积分将归一化为 1.0。所有后续积分都将以第一个积分为基准。
点击菜单 "文件/另存为"，选择 "MestReNova 积分（*.txt）"，将积分列表保存为 "文本文件"。
积分设置：
所有积分曲线均为鼠标敏感曲线，可响应鼠标的常规操作。如果您想向上或向下移动所有积分，只需在任意积分上单击并拖动（使用鼠标左键）（注意，将鼠标悬停在积分上会以红色高亮显示）。如果同时按住 SHIFT 键，积分曲线的高度将发生变化。
如果将鼠标悬停在积分曲线上，点击其中一个绿色方格，然后向上或向下拖动鼠标， 也会产生同样的效果。如果想改变积分的范围，也可以对积分标签进行同样的操作（注意，一旦将鼠标悬停在积分曲线或积分标签的绿色方格上，鼠标指针就会分别变成垂直或水平箭头）。
切割积分： 只需点击积分标签的红色方块并拖动鼠标，即可分割任意积分：
积分管理器（快捷键：Shift+I）：双击任意积分曲线，即可显示积分编辑器。在这里，您可以更改积分范围、将积分归一化为特定积分、浏览积分，还可以将积分参考为波谱的总积分值。
您可以使用不同的积分计算方法（求和、编辑求和和峰值）手动添加积分和多重积分。为避免积分结果产生误解，您可以跟踪每个积分/多重积分所使用的方法。这将显示在积分/多重子管理器中，其中有重新计算每个积分/多重子的选项，可以选择每种情况下的积分方法。
在分析/积分（Analysis/Integrals）菜单下也有类似选项。
用户可以使用箭头按钮调整积分界限的大小
请注意，您可以使用 "上一个或下一个 "图标浏览积分。
如果要调整积分曲线的高度，只需将鼠标悬停在其中一条积分曲线上并按住 SHIFT 键，单击鼠标左键并向上或向下拖动（以增加或减少高度）。
如果想对积分进行归一化处理，只需在 "参照编辑框"（位于积分编辑器上）中覆盖所需值并按 确定，所有积分都将参照所选值进行更新。 用户也可以点击 "删除 "按钮逐个删除积分。
您可以通过选择适用的选项，将相同的积分归一化应用于（当前文档中的）所有波谱或 堆栈图中的所有迹线，如下图所示。例如，如果您需要从一系列一维波谱中确定弛豫时间，以便比较不同迹线之间的积分值，这将非常有用。
使用该命令可以将任何信号的归一化参考值传播到一维或二维堆栈中的所有迹线：
线性校正 线性修正基本上是在每个积分的左右边界之间建立一条直线，使最终区域只包括该直线上方的积分。换句话说，如果 A 是峰值下的总面积，B 是该直线下的面积，则报告的积分 R 将为 R = A - B Mnova 有自动计算这条直线的选项。为了使其正常工作，建议使用良好的数字分辨率（例如通过应用 ZF），因为程序会利用积分两边的 3 个点来建立直线。 如果您想在积分区域应用积分校正或线性基线校正，只需调整 偏置和斜率参数或选中自动检测框即可：
使用偏置 和斜率 校正控制如下：
- 调整偏置 参数，直到积分的初始（左侧）部分平坦为止。 - 调整斜率 参数，使积分曲线的顶部（右侧）平坦。
自动 框会自动计算偏置 和斜率 值。 按钮 "应用于全部 "用于同时修正所有积分。
我们强烈建议在积分前使用任何一种基线校正算法对基线进行校正。
同样，如果在积分上按下鼠标右键，会弹出一个菜单，其中包含以下选项：
编辑积分： 显示积分管理器对话框。 显示积分表：显示积分表 删除积分： 删除当前积分。 Delete All（全部删除）： 删除所有 积分。 Autodetect Nuclides Count（自动检测核素计数）： 该命令对于计数任何波谱中存在的核素非常 有用。 积分只能提供不同核素的相对数量。从实用角度看，首先要计算绝对积分值，然后对积分进行归一化（参考）。
例如，如果我们知道某个积分值对应于一个 CH3 族，我们可以将其设定为 3，这样所有其他积分值都会相应缩放。需要注意的是，这些值并不是精确的整数，需要四舍五入到最接近的整数以获得有效值。但这意味着参考值一开始就应具有正确的强度，而这是无法保证的。
我们的目标是将这一过程自动化，即从绝对积分值开始，自动选择参照组并对剩余值进行缩放，以获得正确的核素数。
这是一种无需事先了解即可自动对 1H NMR 积分进行归一化处理的简单算法。它尤其适用于使用 Mnova 脚本进行自动批处理。
从这种情况开始：
应用该算法后，我们可以得到这个结果：
另请参见： |
