Chemical Shift Referencing

在 NMR 中，频率通常是相对于频率标准测量的。由于这些频率严格来说是相对于与磁场成比例的频率标准测量的，因此可以方便地将化学位移定义为

因此，为了建立化学位移标度，有必要选择某种物质作为参照物并定义其化学位移。在非水溶剂中，最常用的参考物质是TMS（四甲基硅烷），其化学位移被定义为 0.0 ppm。对于生物大分子，由于 TMS 不溶于水，因此使用的化合物略有不同（如 TSP、(CH3)2SiCD3CD2CO2Na、三甲基硅丙酸钠盐）。

有两种参考波谱的方法，一种是图形参考，另一种是使用对话框参考。

图形参考（快捷键 R）只需点击两下即可参考波谱。一次点击选择要参考的位置，另一次点击选择新的化学位移。此功能对于参考堆叠波谱（例如）非常有用：

参考图形

您还可以使用该工具直接参考一维外部轨迹的二维 NMR 图谱。只需按下 "R "键，然后点击要参考的峰值，最后再次点击新的化学位移（与外部迹线的峰值相匹配）即可：

图形参考

您也可以通过选择主菜单上的Analysis/Reference/References （分析/参考/参考 ）（快捷键 L）或点击工具栏按钮，然后按照以下步骤校准频谱：

1.放大包含参考峰的波谱区域

2.选择您希望作为参考点的峰值。您会发现鼠标光标会自动跳到峰的最大值。要在非局部极值的任意位置选择峰值（如峰肩），请按SHIFT键，将鼠标移动到所需位置并单击。将出现以下对话框：

参考 1

参考信号后，您可以输入任何注释。

自动调谐 "选项可以找到限值内的最大峰值并将其作为参考。例如，如果您需要自动参考大量代谢波谱，而溶剂峰可能会随样品 pH 值的变化而发生轻微偏移，那么该选项就非常有用。选中 "使用绝对值 "可将负峰也纳入参考范围。

您可以键入该峰的新值，也可以点击按钮获取溶剂化学位移列表。

参考 2

您可以使用对话框底部的按钮添加新条目或编辑标准参考化学位移列表。

此外还有 "建议处理 "功能，可应用建议处理，并可选择自动参考波谱：

建议处理